紫外可见分光光度计就是利用分光光度法对物质进行定量定性分析的仪器。该仪器是实验室、科研机构、农业、食品厂、饮用水厂等机构检验设备。已经成为现代分子生物实验室常规仪器。常用于核酸,蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。基本原理是指采用一个可以产生多个波长的光源,通过系列分光装置,从而产生特定波长的光源,光源透过测试的样品后,部分光源被吸收,计算样品的吸光值,从而转化成样品的浓度。
其核心部件包括以下几点:
1.电光系统。它是将电能转换成光能的系统,它是由电源和灯泡组成的系统;主要通过它,得到符合后面光学系统所要求的波段范围和光强度(光通量);电光系统的类型各异。
2.光学系统。它是将前面的电光系统传输过来的复合光,变成所需要的单色光的系统。它包括外光路部分、单色器部分和光度室部分。
3.光电系统。它是将从单色器传输过来的单色光信号转换成电信号的统。它的作用是将光信号变为电信号。也是承上启下的部件,既涉及前面的光学系统(特别是单色器),又涉及后面的电子学系统(前置放大器、主放大器)。所以,紫外可见分光光度计设计应从光电系统人手。为了有较好的电流放大倍数,同时又要考虑元器件的价格,这里选用光电倍增管作光电转换器。通过手册,查出光电倍增管的光电参数。根据实践,一般的光学类分析仪器在正常工作时,光电倍增管右为较佳值,此时光电倍增管放大倍数约5.0x10^5倍。要保证光电倍增管稳定正常工作,要有非常稳定的负高压电源(直流)。如果光电倍增管后面采用电压放大器,此时对光电倍增管负载电阻的选择非常重要。如果负载电阻过大(如几个兆欧),会使系统的热噪声很大,造成整个仪器的噪声增大,而且还会增加对前置放大器的输入阻抗匹配的难度。一般情况,在电子学系统采用直流放大器的时候,光电倍增管的负载电阻应为10一200kΩ,从理论上讲,1OkΩ为较佳。
4.电子学系统(或放大器系统)。它对前面的光电系统传输过来的电信号进行放大(电流放大或电压放大等),使之达到或满足后面的A/D系统和计算机系统的要求。电子学系统是保证达到计算机系统能够进行数据处理、计算、控制等要求的系统。
5.计算机、打印输出系统。计算机的自动控制、数据处理、输出打印系统,对前面放大器传输过来的信号大小有明确的、具体的要求。